VP3基因联合多西紫杉醇诱导人前列腺癌细胞株凋亡的实验研究
【出 处】:
【作 者】:
李天庆
[1,2] ;
王剑松
[1] ;
詹辉
[1] ;
袁顺辉
[1] ;
王春晖
[1] ;
颜汝平
[1] ;
李解方
[2]
【摘 要】
目的观察VP3基因、多西紫杉醇各浓度及VP3基因联合多西紫杉醇各浓度对PC-3细胞株的凋亡作用。方法构建重组真核表达载体PcDNA3-VP3,采用基因转染法转染人前列腺癌细胞株PC-3。利用RT-PCR技术检测VP3基因在PC-3细胞株中的表达状况。将多西紫杉醇浓度分为3组,分别为10^-8mol/L、10^-7mol/L、10^-6 mol/L。应用光镜、HE染色、透射电镜形态学、MTT法、流式细胞仪TUNEL法观察转染重组质粒PcDNA3-VP3单独或联合多西紫杉醇各浓度对前列腺癌细胞株PC-3的影响。结果VP3基因转染PC-3细胞后在细胞中得到了表达。HE染色和透射电镜下观察到PC-3细胞的典型凋亡形态学特征。MTT法检测结果显示转染质粒PcDNA3-VP3,单独应用10。mol/L以上浓度的多西紫杉醇及转染质粒PcDNA3-VP3联合应用10^-8mol/L以上浓度的多西紫杉醇均可使PC-3细胞株的增殖活性明显下降(P〈0.01)。流式细胞仪TUNAL法检测单独转染质粒PcDNA3-VP3、质粒PcDNA3-VP3联合10^-8mol/L浓度组及质粒PcDNA3-VP3联合10^-7mol/L浓度组后24h、48h、72h各个时间点上的PC-3细胞株凋亡率分别为(20.31±1.96)%、(41.50±1.03)%、(50.03±3.00)%,(P〈0.01):(31.10±0.59)%、(53.10±0.77)%、(68.90±2.66)%(P〈0.01);(40.01±0.53)%、(62.23±0.74)%、(75.20±0.53)%(P〈0.01)。结论联合10^-8mol/L以上浓度的多西紫杉醇能明显增加VP3基因诱导人前列腺癌PC-3细胞株凋亡。
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