siRNA诱导EZH2基因增强子的表观沉默及其对人前列腺癌细胞的增殖抑制
【出 处】:
【作 者】:
赵雅瑞
[1] ;
罗诚祖
[2] ;
黄文彬
[3] ;
刘特
[4]
【摘 要】
目的通过小分子RNA(siRNA)介导靶基因沉默技术,干扰前列腺癌细胞中果蝇zeste基因增强子的人类同源物的表达,以探讨靶向EZH2基因的RNAi对前列腺癌细胞增殖抑制的效应。方法设计靶向EZH2基因的RNA干扰(RNAi)载体,构建重组表达质粒并且转染人前列腺癌细胞22RV1。利用MTT比色法检测靶向沉默EZH2表达对于22RV1的增殖抑制的影响:利用qRealtime—PCR鉴定转染组与空白组细胞中EZH2基因mRNA的表达量;提取各组细胞的总蛋白,利用Western Blotting检测EZH2蛋白的表达情况。结果在转染了靶向EZH2基因siRNA的细胞株中,可以检测到EZH2表达呈明显的下调趋势;而在空白对照组中其表达很稳定。另外,诱导EZH2基因沉默可以抑制该前列腺肿瘤细胞的增殖和生长。上述结果在各组细胞间呈现明显的统计学差异(P〈0.05)。结论siRNA诱导的RNAi可以有效的抑制其靶基因EZH2的表达,同时可以抑制前列腺癌细胞的增殖和生长,是一种潜在的基因治疗新方法。
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