人OCTN2基因片段的克隆及其GST融合蛋白的原核表达
【出 处】:
【作 者】:
龚东明
[1,2] ;
李铮
[1] ;
郑敏
[3] ;
朱晓斌
[1] ;
平萍
[1] ;
刘玉林
[1] ;
张伟
[1] ;
胡双纲
[3] ;
王益鑫
[1]
【摘 要】
目的从人附睾组织中克隆OCTN2基因,构建PGEX-2T—OCTN2载体,原核表达人OCTN2重组蛋白。方法 应用RT—PCR方法从人附睾组织中克降OCTN2,利用ECoR Ⅰ和BamH Ⅰ酶切位点把OCTN2克隆到PGEX-2T载体,酶切和测序鉴定后,大量诱导重组蛋白并回收。结果从人附挈组织中克隆到人OCTN2的基因片段,构建了PGEX-2T-OCTN2载体,表达了预期相对分子质量的融合蛋白并大量回收。结论成功克隆OCTN2,表达并大量回收其融合蛋白,为制备人OCTN2特异性抗体、进一步研究附睾肉碱转运机制奠定了前期基础。
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