减数分裂重组关键蛋白MLH1结合蛋白的酵母双杂交筛选和鉴定
【出 处】:
【作 者】:
殷毅
[1,2] ;
平萍
[1]
【摘 要】
目的:探寻减数分裂关键重组蛋白MLH1在精子发生中的结合蛋白。方法以MLH1为诱饵,通过酵母双杂交系统,在小鼠睾丸组织的cDNA文库中进行筛选,寻找MLH1的相互作用蛋白并通过GST pull-down和免疫共沉淀的方法进行验证。结果通过酵母双杂交的筛选,在小鼠睾丸中经四缺板筛出蛋白29个,包括已知的MLH3和PSM2等。通过GST Pull-down和免疫共沉淀验证了其中一个新的蛋白RHNO1与MLH1的结合。通过Real-time PCR检测发现RHNO1在睾丸中高表达,提示RHNO1在精子发生中具有重要功能。结论酵母双杂交系统是寻找结合蛋白的有力手段,发现了新的MLH1结合蛋白RHNO1,可能参与了减数分裂同源重组。
相关热词搜索: 精子发生 减数分裂 重组蛋白质类 spermatogenesis meiosis Recombinant Proteins
上一篇:2998例男性患者解脲脲原体、淋病奈瑟菌和沙眼衣原体感染调查分析
下一篇:糖尿病大鼠阴茎海绵体GSH、GSSG和GSH/GSSG对eNOS表达的影响