miR-155、miR-15a和miR-181c在糖尿病环境下对人阴茎海绵体血管内皮细胞功能的影响
【出 处】:《
中国男科学杂志
》
CAS
CSCD
2015年第0卷第12期 3-8页,共7页
【作 者】:
关瑞礼
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雷洪恩
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许永德
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杨璧铖
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李辉喜
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王林
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辛钟成
【摘 要】
目的:晚期糖基化终产物AGEs联合高糖(AGE-BSA+高糖)刺激人阴茎海绵体血管内皮细胞(HCECs)诱导糖尿病环境,观察其对内皮功能相关的miR-155、miR-15a和miR-181c及其靶基因的表达变化影响。方法利用人阴茎海绵体分离鉴定的HCECs,随机分为两组:正常+BSA组(NC组)、AGE-BSA+高糖(DM组)。采用蛋白印迹实验检测RAGE蛋白表达确定诱导体外糖尿病环境;采用实时定量PCR来检测miR-155、miR-15a和miR-181c及对应靶基因eNOS、TXNIP、VEGFA、IRS1和KLF6的mRNA表达变化;采用蛋白印迹实验验证靶基因的蛋白表达变化。结果与NC组相比,DM组在AGE-BSA+高糖刺激下,RAGE基因的mRNA水平和蛋白水平均明显升高;同时观察到miR-155表达明显升高而miR-15a和miR-181c的表达明显降低。miR-155对应的靶基因eNOS的mRNA水平和蛋白水平明显降低;miR-15a对应的靶基因TXNIP的mRNA水平和蛋白水平明显升高,靶基因IRS1的mRNA水平明显升高但蛋白水平变化不明显,靶基因VEGFA的mRNA水平没有显著变化;miR-181c对应的靶基因KLF6的mRNA水平和蛋白表达水平明显升高,而靶基因IRS1的mRNA水平明显升高但蛋白水平变化不明显。结论 HCECs在AGE-BSA+高糖刺激的糖尿病环境下,miR-155、miR-15a和miR-181c均有显著的表达差异,并负调控它们对应的靶基因eNOS、TXNIP及KLF6发生不同程度的表达变化。结果提示糖尿病环境下的HCECs中多种miRNAs可能参与了糖尿病内皮功能障碍的发生发展过程,其具体的机制有待进一步深入研究。
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