小鼠Bin1b真核表达载体pSG.SS.C3d3.YL-Bin1b构建及在真核细胞HEK293中的表达
【出 处】:《
中国男科学杂志
》
CAS
CSCD
2014年第0卷第9期 3-7页,共6页
【作 者】:
周波
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孙中义
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靳风烁
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李彦锋
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张军
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张克勤
【摘 要】
目的:构建表达小鼠抗菌肽蛋白(Bin1b)的真核表达载体pSG.SS.C3d3.YL-Bin1b,对其在HEK293细胞中的表达进行检测分析。方法应用PCR方法获得Bin1b的cDNA片断,将其插入pSG.SS.C3d3.YL中,经酶切鉴定正确后转染HEK293细胞,利用间接免疫荧光结合激光共聚焦技术、Western blot技术、免疫组织化学染色技术及流式细胞仪检测技术对Bin1b的表达进行检测。结果构建成功后的pSG.SS.C3d3.YL-Bin1b在HEK293细胞中能够表达Bin1b。结论 Bin1b在真核细胞中的成功表达为后续研究Bin1b的高表达对受精过程的影响奠定了基础。
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